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细胞核染色 - DAPI染色液

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2024-11-21T00:00 (访问量:17205)

产品介绍

DAPI,也称DAPI dihydrochloride,是一种常用的核酸染料,和EB(ethidium bromide)相比,DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。尽管DAPI不能通过活细胞膜,但可以通过提高浓度使之进入活细胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色体DNA。

 

技术原理

DAPI可以和双链DNA富含AT序列的小沟结合,产生比自身强20多倍的蓝色荧光。DAPI也可对RNA进行染色,染色机理是其可以选择性嵌入“AU序列”并发出荧光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm),DAPI-RNA具有较长的最大发射波长(500 nm),其荧光亮度仅有DAPI-dsDNA的20%。

 

运输与保存方法

冰袋运输,5 mg/mL的DAPI储存液于-20ºC避光保存,1年有效。

 

使用方法

1、用双蒸水或PBS稀释母液,配制成所需要的工作的浓度(0.5-10 μg/mL)。

2、对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI 染色。

3、细胞培养物中加入适量DAPI染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL染色液,对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。 

4、在37℃培养细胞 10~20 分钟。

5、用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

6、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360 nm,发射波长460 nm。

 

不同DAPI染色的结果

注意事项

1)DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。

2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。

3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4)低浓度的DAPI不容易穿透细胞膜。

 

相关产品

产品名称

产品货号

规格

DAPI染液(5mg/ml)

40728ES03

1mg (200μl)

DAPI 4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

40727ES10

10mg

Propidium iodide Staining Solution(1mg/ml)碘化丙啶染液(1mg/ml)

40710ES03

1ml

PI (Propidium iodide) 碘化丙啶

40711ES10/60

10mg/100mg

7-AAD 7-氨基放线菌素D

40722ES03

1 mg

Trypan Blue台盼蓝

40724ES10

10 g

 

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