PI(Propidium Iodide)碘化丙啶的应用-技术前沿-资讯-生物在线

PI(Propidium Iodide)碘化丙啶的应用

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2024-11-21T00:00 (访问量:16933)

介绍

PI(Propidium iodide),即碘化丙啶,是一种常用的荧光染料,在细胞生物学研究中发挥着重要作用。它不能透过完整的细胞膜,但在细胞凋亡晚期或细胞膜受损时,能够进入细胞并与核酸结合,发出红色荧光。PI常用于细胞活力检测、细胞周期分析以及细胞凋亡研究等领域。

技术原理原理

PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用这一特性,通常与Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用,同时对活细胞和死细胞染色和鉴定,用于细胞凋亡相关的研究。也可以用作多重荧光染色的复染剂,兼容于各种细胞标记技术,包括直接或者间接的荧光抗体检测,mRNA原位杂交,细胞结构特异性的荧光探针检测法以及组织染色。PI的单独染色也可以进行细胞周期的检测。

 

使用方法

1、收集细胞,密度约 2×105~1×106。离心后吸除上清,轻弹管壁就剩下的液体重悬细胞。加入1 mL常温存放的PBS;

2、将所有的重悬细胞转移到4 mL于-20ºC预冷的无水乙醇,在高速涡旋混匀的同时一边用枪缓慢的添加细胞悬液到乙醇内。于-20ºC乙醇中固定5 - 15 min。

3、离心收集细胞,除去乙醇。轻弹管壁以弹松细胞后,加入5 mL室温的PBS。允许细胞水化15 min;

4、用染色液(100 mM Tris, pH 7.4、150 mM NaCl、1 mM CaCl2、0.5 mM MgCl2 , 0.1% Nonidet® P-40)稀释1 mg/mL(1.5 mM)PI储存液1:500,得到3 µM的PI工作液。1 mL 的PI染色液足够用于每个细胞样本的检测。

5、 样本制备步后离心收集细胞,去除上清,用手轻弹管壁以弹松细胞后,加入1 mL的PI染色工作液。室温孵育15 min后,流式细胞仪进行细胞分析。

 

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。4 ºC避光保存,至少一年稳定。

 

常见问题

1)碘化丙啶(PI)是已知的诱变剂,因此PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

相关产品

产品名称

产品货号

规格

Propidium iodide Staining Solution(1mg/ml)碘化丙啶染液(1mg/ml)

40710ES03

1ml

PI (Propidium iodide) 碘化丙啶

40711ES10/60

10mg/100mg

DAPI 4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

40727ES10

10mg

DAPI染液(5mg/ml)

40728ES03

1mg (200μl)

7-AAD 7-氨基放线菌素D

40722ES03

1 mg

Trypan Blue台盼蓝

40724ES10

10 g

 

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