翌圣Hieff Clone®系列分子克隆试剂盒(累计影响因子1300+)-技术前沿-资讯-生物在线

翌圣Hieff Clone®系列分子克隆试剂盒(累计影响因子1300+)

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2024-11-21T00:00 (访问量:19046)

翌圣Hieff Clone®系列克隆试剂盒,历经数次迭代与优化,如今已囊括了从基础克隆到高通量、高效能的一站式分子克隆系列解决方案,既含有用于载体构建、基因突变等的通用型一步法快速克隆试剂盒,又含有用于测序、储存DNA片段的通用型TOPO克隆试剂盒(兼容TA和平末端)。

翌圣Hieff Clone®系列克隆试剂盒自2017年诞生至今,客户好评不断,每年均有客户使用克隆试剂盒产品发表高分文章,包括Nature、Cell等多个顶级期刊,获得科研大牛们认可!据不完全统计,截至2024年10月31日,翌圣克隆试剂产品多年来累计参与发表文章173篇文章,累计影响因子达1388.86,包括一步法快速克隆试剂盒和TOPO克隆试剂盒。

 

最新通用型产品推荐

产品分类

产品定位

产品名称

产品货号

规格

快速克隆试剂盒

1-7片段一步法定向连接,最快5分钟完成重组反应

Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit

10923ES20/50

20 T/50 T

TOPO克隆试剂盒

兼容TA/平末端克隆

Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit

10906ES08/20

5 T/20 T

 

通用型多片段一步法快速克隆试剂盒

小翌强烈推荐翌圣通用型多片段快速克隆试剂盒(Cat#10923ES),满足6 μL小体系、10 ng低浓度载体与片段的连接,菌落数多,克隆阳性率高,客户反馈效果好!(右戳申请试用☞ 试用装申请

 

一步法克隆与传统酶切克隆方法的比较

方法

插入片段制备

酶切位点限制

通用性

连接时间

阳性率

一步法快速重组克隆技术

1步纯化

★★★★★

最快5 min

高达95%

酶切连接克隆技术

2步纯化

★★

过夜

不同基因差别大

优势性能

· 定向:可满足1-7个DNA片段的定向无缝拼接

· 简便:片段无需酶切,多片段连接一管内即可完成

· 快速:最快5分钟即可完成连接反应

· 高效:克隆生长数多,克隆阳性率可达95%以上

· 广泛:适用于任何载体,兼顾粘性和平末端;可用于多片段、点突变等的克隆

· 超长:载体片段连接长度可达25 kb以上

 

性能展示

· 单片段6 μL小体系高效重组

图1. 在6 μL小体系非复苏感受态下,连接10 ng低投入量单片段。结果显示,10923ES性能好于竞品,连接效率高,菌落数多,阳性率达100%。A-B:重组转化平板。载体(10 kb)和插入片段(1 kb)摩尔比为1:2。C:插入片段PCR鉴定电泳图,M:Yeasen 10505ES。

· 低浓度多片段高效重组

图2. 分别连接低浓度的五片段和六片段。结果显示,10923ES在低浓度下连接性能稳定,菌落数多,阳性率100%。A-B:重组转化平板。载体(11.6 kb)和插入片段(5片段共5.6 kb、六片段共7.6 kb)摩尔比为1:2。C-D:插入片段PCR鉴定电泳图,M:Yeasen 10505ES,菌P长度2.6 kb。

 

客户体验反馈专区

01 高效、快速小体系单片段连接

图3. Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit 10 μL小体系单片段连接和点突变克隆,阳性率100%。A&C:重组转化平板。B:插入片段PCR鉴定电泳图,泳道1-5分别为菌落1,菌落2,阴性对照,阳性对照(基因组作为模版),阳性对照(PCR纯化片段作为模版)。D:插入片段PCR鉴定电泳图。

 

02 高效、快速多片段连接

图4. Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit多片段连接,阳性率100%。A&C:重组转化平板。B:插入片段测序鉴定图。D:插入片段PCR鉴定电泳图。

 

通用型TOPO克隆试剂盒

小翌强烈推荐翌圣零背景通用型TOPO克隆试剂盒(Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit,Cat#10906ES),利用新一代拓扑异构酶(Topoisomerase)的原理,搭配高效的平末端化因子,仅需5 min快速克隆连接平末端产物和粘性末端产物,操作简单,连接效率极高,克隆阳性率接近100%,客户反馈效果好!(右戳申请试用☞ 试用装申请

 

TOPO克隆与传统TA克隆方法的比较

方法

反应时间

反应温度

体系组成

克隆阳性率

PCR产物

TOPO克隆技术

5 min

室温

载体+插入片段

★★★★★

载体无需加“A”

传统TA克隆技术

过夜

16℃

载体+插入片段+T4连接酶

★★

需要加“A”

 

优势性能

· 快速:仅需5分钟即可完成连接反应。

· 高效:无自连现象,阳性克隆率接近100%,无需设置蓝白斑筛选。

· 连接片段:可连接150 bp-5 kb目的产物。

· 简便:只需加入纯化后目的片段即可。

· 兼容性广:添加平末端因子,兼容TA克隆与平末端克隆。

 

性能展示

· 平末端/粘性末端片段高效连接

图5. 相同体系下,分别投入200 bp粘性末端片段、1 kb粘性末端片段、2 kb平末端片段、4 kb平末端片段进行连接,结果显示,Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit试剂盒可以兼容粘性末端和平末端片段TOPO克隆。

 

客户体验反馈专区

· 平末端克隆高效连接

图6. 3000 bp(120 ng)平末端片段连接,Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit连接效率高,菌落数多,阳性率100%。A:连接转化平板。B:插入片段PCR鉴定电泳图。

· 粘性末端片段高效连接

图7. 100 bp-500 bp(50 ng)粘性末端片段连接,与进口产品相比,10906ES连接效率高,菌落数多,4组样品各挑10个单克隆,所有有效单克隆全为成功插入,阳性率100%。A&B:连接转化平板。C:插入片段测序鉴定图。

 

Hieff Clone®系列克隆产品近年来助力高分文章成果

· 2017年

· 研究团队:中国科学院分子细胞科学卓越创新中心陈玲玲课题组

· 发表期刊:Cell

· 影响因子:30.410

· 翌圣产品:Hieff Clone® One Step Cloning Kit(该货号已下架)

 

· 2018年

· 研究团队:浙江大学生物医学工程与仪器科学学院

· 发表期刊:Molecular Cell

· 影响因子:14.548

· 翌圣产品:Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit(Cat#10911ES)

· 2019年

· 研究团队:中国科学院分子细胞科学卓越创新中心

· 发表期刊:Cell

· 影响因子:36.216

· 翌圣产品:Hieff Clone® One Step Cloning Kit(该货号已下架)

· 2020年

· 研究团队:北京工商大学植物资源研究与开发北京市重点实验室

· 发表期刊:Nature Communications

· 影响因子:12.121

· 翌圣产品:Hieff Clone® Plus Multi One Step Cloning Kit(Cat#10912ES)

· 2021年

· 研究团队:中国科学院分子细胞科学卓越创新中心

· 发表期刊:Molecular Cell

· 影响因子:17.970

· 翌圣产品:Hieff Clone® One Step Cloning Kit(该货号已下架)

· 2022年

· 研究团队:华东理工大学药学院

· 发表期刊:Cell Metabolism

· 影响因子:31.373

· 翌圣产品:Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit(Cat#10911ES)

· 2023年

· 研究团队:中国科学院分子细胞科学卓越创新中心

· 发表期刊:Nature

· 影响因子:69.504

· 翌圣产品:Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit(Cat#10911ES)

· 2024年

· 研究团队:武汉大学生命科学学院

· 发表期刊:Nature Microbiology

· 影响因子:30.964

· 翌圣产品:Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit(Cat#10911ES)

 

相关产品

产品系列

产品定位

名称

货号

规格

一步法快速克隆试剂盒

单片段一步克隆,已发文章累计IF达到1000+

Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit一步法快速克隆试剂盒

10911ES20/50

20 T/50 T

1-6片段一步克隆,最快5分钟完成重组反应

Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit通用型一步法快速克隆试剂盒

10922ES20/50

20 T/50 T

TOPO克隆试剂盒

替代TA连接克隆

Hieff Clone® Zero TOPO-TA Cloning Kit

10907ES20

20 T

替代TA连接克隆(不含MCS多克隆位点)

Hieff Clone® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted

10908ES20

20 T

替代平末端连接克隆

Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit

10909ES20

20 T

替代平末端连接克隆(不含MCS多克隆位点)

Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit, MCS-Depleted

10910ES20

20 T

感受态细胞

5 min快速完成感受态转化

DH5α Fast Chemically Competent Cell F DH5α化学感受态

11803ES80

10×100 μL

常规感受态细胞

TOP10 Chemically Competent Cell TOP10化学感受态细胞

11801ES80

10×100 μL

常规感受态细胞

DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞

11802ES80

10×100 μL

常规感受态细胞

BL21(DE3) Chemically Competent Cell BL21(DE3)化学感受态细胞

11804ES80

10×100 μL

高保真PCR

5s/kb,保真保快

2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)

10164ES03/08

1 mL/5×1 mL

快速PCR

快速PCR升级,可菌P且适用复杂模板扩增

2×Hieff® Ultra-Rapid II HotStart PCR Master Mix

10167ES03/08

1 mL/5×1 mL

 

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