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磺酰罗丹明 B(SRB)在细胞增殖中的应用

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2024-11-21T00:00 (访问量:16143)

SRB 介绍

磺酰罗丹明 B(Sulforhodamine B,SRB)是一种粉红色的阴离子染料,在细胞生物学研究中被广泛用于细胞增殖和细胞毒性的检测。SRB 可以与细胞内的蛋白质结合,形成稳定的复合物,其颜色强度与细胞内的蛋白质含量成正比。

 

技术原理

蛋白质结合:SRB 能够与细胞内的碱性氨基酸残基结合,特别是与精氨酸、赖氨酸和组氨酸等残基结合。这种结合是相对稳定的,并且在酸性条件下不易解离。

颜色强度与蛋白质含量的关系:SRB 与细胞内蛋白质结合后,形成的复合物在特定波长下具有较高的吸光度。吸光度的大小与细胞内的蛋白质含量成正比,因此可以通过测量吸光度来间接反映细胞的数量或生物量。

 

运输和保存方法

冰袋运输。4℃保存,2年有效。

 

使用方法

1. 取出细胞,弃去培养液;

2. 小心加入固定液,每孔100 µL,4℃孵育1 h,弃去固定液;

3. 加入清洗液1,每孔100 µL,室温下静置30 s,弃去清洗液1,重复该步骤;

4. 加入染色液,每孔50 µL,室温下避光孵育15 min,弃去染色液;

5. 加入清洗液2,每孔100 µL,弃去清洗液2(该步骤需快速完成,以免染色漏出胞外),重复该步骤5-10次,直至把多染料洗尽为止;

6. 加入溶解液,每孔100 µL,室温下避光孵育5 min;

7. 于515 nm波长检测其吸光值。

 

相关问题

Q:SRB染色是否会影响细胞的活性?

A:SRB染色本身通常不会对细胞的活性产生明显影响。但是,在固定和染色过程中,要注意使用适当的条件,避免对细胞造成过度损伤。

Q:SRB染色与MTT法、CCK-8法等如何选择?

A:MTS、CCK8及SRB法等都是用来检测细胞代谢活性的方法,可根据实验要求和预算进行选择。

Q:如何处理 SRB 染色后的废液?

A:SRB 染色后的废液含有酸性和有毒物质,应按照实验室的规定进行妥善处理。一般来说,可以将废液收集在特定的容器中,经过中和和处理后再排放。

 

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产品货号

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