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线粒体探针应用 - 罗丹明123(Rh 123)

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2024-11-21T00:00 (访问量:5939)

产品概述

Rhodamine 123(Rh123)作为一种在细胞生物学研究中被广泛运用的荧光染料,具有独特的性质和重要的应用价值。它能够选择性地在活细胞的线粒体内积聚,因此常被用于对线粒体功能及细胞活力的研究。Rh123在化学性质方面表现得极为独特,属于亲脂性阳离子染料,凭借其脂溶性可轻松透过细胞膜,并借助线粒体膜电位在线粒体内积累。从光学角度来看,当激发波长为488 nm时,Rh123被激活,在530 nm处会发出强烈的绿色荧光。由于具有高量子的荧光发射效率,Rh123能够产生高对比度的荧光信号,从而成为细胞生物学实验中极为有用的工具。

 

产品应用

细胞活力测定:通过检测细胞内的Rh123荧光强度,可以评估细胞的活力状态。

线粒体功能检测:Rh123的荧光强度与线粒体膜电位成正比,可用于评估线粒体是否处于健康状态。

药物筛选:可用于筛选影响线粒体功能的药物,评估药物对细胞生理功能的影响。

 

溶液的配制 

用 DMSO 溶解,终浓度为1 - 5 mM。溶液分装,避光保存于-20ºC。

 

使用方法 

1、用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104~5×105个/mL。

2、孵育该载玻片,用PBS或Hanks液洗涤细胞。

3、用培养基稀释Rh123母液以制备1~20 µM Rh123缓冲液。具体工作浓度取决于细胞类型和细胞浓度。

4、将Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育30 min至1小时。

5、去除Rh123缓冲液并用培养基洗涤细胞(洗涤细胞后为了固定,加入10%福尔马林缓冲液并孵育15~20 min,接着用PBS洗涤)。

6、用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。

 

常见问题

1. 染色不足的原因

可能是染料浓度过低或孵育时间不足。可以适当增加Rh123浓度或延长孵育时间。

1. 过度染色的原因

染料浓度过高或孵育时间过长,会引起非特异性染色。可尝试降低 Rh123浓度或缩短孵育时间。

1. 线粒体荧光信号弱的处理方式

①可能是细胞状态不佳或线粒体功能受损。

②对于线粒体含量较少的细胞,可以使用较高的染料浓度和较长的孵育时间

 

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产品名称

货号

规格

Rhodamine 123 罗丹明123

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